关键字：胚胎肾祖细胞，功能性遗传靶向

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简介： 摘要
胚胎哺乳动物后肾间充质（MM）是一种独特的组织，因为它能够响应Wnt信号传导而产生肾单位。将MM与输尿管芽（UB）（天然诱导物）分离的离体培养物可用作研究肾发生的经典肾小管诱导模型。然而，技术限制目前阻止使用该模型来研究分子。在小管诱导之前或期间的遗传细节。使用肾单位片段特异性标记物，我们现在显示MM体外小管诱导也导致高度分割的肾脏的组装。当MM组织解离成细胞悬浮液然后在人重组骨形态发生蛋白7 /人重组成纤维细胞生长因子2存在下重新聚集（drMM）24小时之前，重构该诱导能力，然后诱导。当与UB重组时，生长因子处理的drMM也恢复了器官发生的能力。嵌合drMM培养物的细胞追踪和延时成像表明，肾单位不是来自单个祖细胞。此外，病毒载体介导的绿色荧光蛋白转导在解离的MM细胞中比在完整的间充质中更有效，并且转导的drMM祖细胞的肾源性能力得以保留。此外，用介导Lhx1敲低的病毒载体转导的drMM细胞被排除在肾小管之外，而掺入了用对照载体转导的细胞。总之，这些技术允许在离体器官培养/类器官环境中对肾发生和肾脏器官发生背后的机制进行可重复的细胞和分子检查。