关键字：肾发育，定量分析

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简介： 分枝形态发生是肾发育的核心过程，但是除了早期器官发生之外的成像和量化这一过程提出了由于肾的生长阻止复杂结构的成像的挑战。目前对肾脏发育的分析很大程度上依赖于外植体器官培养和共聚焦显微镜可视化，因为更加发育先进的天然组织对于常规显微成像而言太厚。培养的肾原基缺乏血管形成和正常生长的支持基质，导致组织压缩和为了解决这个问题，我们使用光学投影断层扫描技术对离体胚胎肾脏的分支输尿管上皮进行成像和重建，并开发了软件来量化这些三维（3D）数据。通过测量3D空间中的树和末端分支长度，尖端数量，分支迭代，分支角度和尖端间距来评估输尿管分支。为验证这种方法分析遗传对肾脏发育的影响，我们评估了Tgfb2中的分支和器官形态。胚胎从E12.5到E15.5。我们发现分支减少，与先前使用器官培养的发现相反，并且量化了肾盂形成的主要缺陷。我们的方法通过改善通量，分析和体内分支状态的观察提供了许多优点，并且已经证明其在研究肾发育疾病的基础中的实用性。