关键字：血管加压素，远端回旋小管，噻嗪类，氯化钠，转运蛋白，磷酸化

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简介： 噻嗪类敏感的Na+—Cl-协同转运蛋白（NCC）对于肾电解质平衡是重要的，并且其磷酸化导致其运输活性和细胞定位的增加。在这里，我们生成针对两个保守的N-末端磷酸化位点（Thr53，Thr58和Thr53 / Thr58）的磷酸特异性抗体，以评估精氨酸加压素（AVP）在体内调节啮齿动物肾脏中的NCC中的作用。免疫组织化学显示磷酸化的明显染色。 NCC（pNCC）位于远曲小管（DCT）细胞的顶端质膜结构域。与总NCC不同，通过免疫金电子显微镜测定，pNCC仅定位于顶端质膜。在AVP缺陷的Brattleboro大鼠中，急性deamino？Cys-1，d-Arg-8加压素（dDAVP）暴露显着增加顶端质膜上的pNCC丰度约三倍，而总NCC及其细胞分布不受影响。 dDAVP显着增加磷酸化STE20 / SPS1相关的富含脯氨酸 - 丙氨酸的激酶和氧化应激反应激酶（SPAK和OSR1）的丰度，这些激酶与NCC磷酸化有关。早期和晚期DCT中的细胞内钙水平随着dDAVP的1分钟灌注而增加，证实这些区段是AVP反应性的。在喂食具有血管紧张素（ANG）1型受体阻断的高盐饮食的大鼠中，pNCC的类似增加在慢性或急性dDAVP后检测到活性SPAK和OSR1，因此表明AVP的作用独立于ANGII。我们的研究结果表明，AVP是NCC活性的有效调节剂。