关键字：中华医学会肾脏病学分会，2015年，学术年会，壁报交流

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简介： Twist-Bmi-1 通过调控 PI3K/Akt 通路促进肾间质纤维化
段梦露
第四军医大学附属西京医院 710032
目的：肾脏纤维化是各类慢性肾脏病发展至终末期的共同病理表现，但其病理机制尚不完全清楚。前期研究已证实 Twist 是促进肾间质纤维化的关键分子，但其具体分子机制不明。因此，本论文旨在探讨 Twist 促进肾间质纤维化的具体分子机制。
方法：利用转录因子活性谱芯片技术对 108 例 CKD 患者肾组织进行筛选，获得 CKD 患者肾组织和对照肾组织中差异表达的转录因子，选择显著高表达的转录因子进行生物信息学预测：该转录因子启动子区是否存在 Twist 潜在的结合位点 E-box 序列(CANNTG)。进一步报告基因和 ChIP 实验筛选出能被 Twist 直接转录激活的转录因子。构建该转录因子的正义及反义质粒，转染 HK-2 细胞并缺氧处理 48h 或 50mmol/ L 右旋葡萄糖刺激 48h， qRT- PCR、 Western blotting、免疫组化和免疫荧光方法检测 PI3K/Akt 的表达水平及促纤维化因子 TGF-β、 α-SMA、 FN、 COL1A1、 COL3A1 的表达。构建小鼠 UUO 肾间质纤维化模型，分别腹腔注射抑制或增强该转录因子表达的慢病毒载体， HE 和Masson 染色方法检测间质纤维化程度； qRT- PCR、 Western blotting、免疫组化和免疫荧光方法检测 PI3K/Akt 的表达及促纤维化因子 TGF-β、 α-SMA、 FN、 COL1A1、 COL3A1 的表达水平。