小鼠足细胞特异性三苯氧胺诱导Cre重组酶的表达(英文)
发布时间:2019-04-28 11:54:59 浏览量: 1842
关键字:小鼠足细胞,特异性三苯氧胺,Cre重组酶
简介: 摘要
背景:足细胞在维持肾小球功能正常中起着重要作用。利用表达足细胞特异性Cre重组酶的转基因小鼠来阐明在足细胞中表达的基因的作用,建立了一种足细胞特异性条件敲除技术。然而,使用传统的足细胞特异性敲除小鼠来检测基因在某些病理条件下的作用可能是困难的,因为它们可能具有胚胎致死性或表现出先天性肾异常。
方法:为了在以足细胞为靶点的遗传实验中引入时间控制,我们构建了在足细胞特异性启动子、人足细胞素(NPhs2)基因2.5-kb片段控制下的三苯氧胺诱导的Cre重组酶(Creert2)转基因小鼠。CRE活性的特异性和效率通过将NPHS2–Creert2与Rosa26报告小鼠(r26r)杂交来检测,在该小鼠中,β-半乳糖苷酶基因上游放置了一个浮动的停止盒。4周大的双突变小鼠(NPhs2–Creert2/r26r)连续3天腹腔注射0.5 mg 4-羟三苯氧胺(4-oht)。